​大肠杆菌检测方法(大肠杆菌检测实验)

大肠杆菌检测方法(大肠杆菌检测实验)

大肠杆菌检测 *** 主要包括传统的培养 *** 和分子生物学检测 *** 。传统的培养 *** 主要是通过菌落计数进行检测，常用的培养基包括MacConkey培养基、EC培养基等。而分子生物学检测 *** 则是通过PCR、RAPD、PFGE等技术检测大肠杆菌的存在。这些 *** 可以快速检测大肠杆菌的污染，并且提高了检测的准确性和可靠性。

一：大肠杆菌检测 ***

1、发酵法

这种 *** 主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。

采用这样的方式 *** ，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等  。

2、滤膜法

该 *** 主要过程：加入 10 mL 左右的无菌水于滤器中，然后掺入一些无菌水进行清洁滤器的内壁，再进行过滤，将滤膜放在 M-FC 培养基中，两者之间不能够有气泡，然后进行密封，存放温度为 44.5℃，存放时间约 24 h，直到大肠杆菌的菌群变成蓝色或蓝绿色。

然后记录数据，估算每一单位的水溶液菌群数量，然后进行大肠杆菌量值的换算 。

扩展资料：

大肠杆菌是短杆菌，两端呈钝圆形，革兰阴性。有时因环境不同，个别菌体出现近似球杆状或长丝状 ；大肠杆菌多是单一或两个存在，但不会排列呈长链形状。

大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构，但是不能形成芽孢；多数大肠杆菌菌株生长有菌毛，其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛 。

生化特性

大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中，甲基红试验呈阳性，吲哚产生和乳糖发酵是阳性（个别菌株表现阴性），维-培试验是阴性，尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性（极个别菌株表现阳性），硝酸盐还原试验表现阳性，氧化酶表现阴性，氧化-发酵试验表现为F型

参考资料

大肠杆菌测定

伊红美蓝平板上典型大肠杆菌菌落接种到营养琼脂平板，在(36土1)℃培养18h -24 h 。每个平板至少挑选2个菌落。挑取上述菌落纯培养物接种3.6.3生化培养基和乳糖发酵管，(36士1)0C培养24h 后观察结果。

大肠杆菌与非大肠杆苗鉴别试验 ***

靛基质试验:

滴加Kovacs氏靛基质试剂0.1 m L于靛基质试验培养基中混合，静置，观察结果。

出现红色环的为反应阳性;出现黄色环的为反应阴性。

甲基 红(MR)试验:

滴加甲基红指示剂0.2 m 1于MR-VP培养基中混合，观察结果。

出现红色为阳性反应;出现黄色为阴性反应。

维 培(VP)试验:

滴加VP试剂甲液0. 2 mL于MR-VP培养基中混匀，再滴加VP试剂乙液0.1mL混匀，静置，观察结果。在15min内出现红色的为阳性反应;无颜色变化的为阴性反应。阴性结果1h后再观察一次出现红 色也为阳性反应。

西蒙氏柠檬酸盐试验:观察培养基颜色变化，出现蓝色为阳性反应;不变色为阴性反应。

大肠杆菌鉴定结果

靛基质 MR VP 西蒙氏柠檬酸盐 鉴定

＋

－ ＋

＋ －

－ —

－ 典型大肠艾希氏杆菌

非典型大肠艾希氏杆菌

＋

－ ＋

＋ －

－ ＋

＋ 典型柠檬酸盐杆菌

非典型柠檬酸盐杆菌

－

＋ －

－ －

－ ＋

＋ 典型产气肠杆菌

非典型产气肠杆菌

如出现表1以外的生化反应类型，表明培养物可能不纯，应重新划线分离，必要时做重复试验。

结果报告

1M Vic 试 验结果为++一一、一+一一和乳糖发酵管产气者，查其EC肉汤产气管数及其稀释倍

数，对照附录B(资料性附录)中MPN检索表报告样品中大肠埃希氏杆菌MPN /a (mL)值

二：大肠杆菌检测 *** 国标

1、对的，要用专门的杀菌过的，良好密封性的取样瓶，2、如果是外检的话，你可以去外检公司直接领一个取样瓶，并且尽快取好水样后，给他检测。

3、注意：这种取样瓶，打开后就要用，不用的话，重新密封也没用了。

4、其实：按照现况，很少见到操作很规范的人。一般不会那么严谨。

三：大肠杆菌检测国标

大肠杆菌检测仪【莱恩德LD-W80】是可以检测大肠杆菌含量的仪器，可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本；样本在检测时无需任何的前处理过程，直接丢入检测瓶即可。作为检测大肠杆菌含量的仪器，接下来为大家介绍下大肠杆菌检测仪的检测范围：

检测范围：

活细菌总数

大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157,O111,O104等

肠道杆菌科

金黄色葡萄球菌

铜绿假单胞菌；绿脓杆菌

沙门氏菌

李斯特菌

肠球菌

酵母菌

应用范围：

卫生控制：

-食品（HACCP）

-厨房、工具、表面（HACCP）

-水质

-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫

-药品及化妆品

与我们的生活息息相关，例如：

咖啡馆、餐厅

水源检测、制水厂

分析实验室和HACCP诊断

农产品及相关加工公司

药厂、药房、化妆品厂

环境监测机构

水配送公司

消费者保护团体、工商管理机构

室内空调调节公司

集传统检验 *** 优点于一身:

-培养皿法

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检验样本无需任何前处理

-液态样本，固态样本和表面样本均无需前处理

定性和定量分析

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简单便捷

-简单的三个步骤得到检测结果

检验迅速

-是传统检验 *** 速度的2～5倍

高灵敏性

-可以检测到1目标微生物（理论极值）

高特异性

-特异性高达99.999%（理论极值）

检测瓶就是实验室

-微生物检测瓶随时可用

-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测

使用后安全丢弃

-和过期药物同样处理

微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测。

大肠杆菌检测仪